Imágenes, imágenes y más imágenes del virus VIH que provoca el SIDA

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Tomada de Goto y col. (1998) Micron. 1998 29:123-38

Si quieres conocer las diferencias entre los exosomas y el VIH puedes pinchar en este ENLACE

Como en este mundo tiene que haber todo también existe un grupo de personas que son negacionistas del virus VIH, dicen que éste no existe y que nadie lo ha visto. Los más educados dicen que solamente ha sido fotografiado un número de veces muy pequeña (menos que los dedos tiene una mano) y que estas fotografías son un error científico de grueso calibre, mientras que los más maleducados acusan directamente de estafadores, manipuladores y vendidos a las farmacéuticas a todo aquel científico que opine que el VIH existe. Me he molestado en darme una vuelta por la literatura científica existente para ver si hay fotos del VIH, y si el número es menor a los dedos de una mano, o pasa de largo.

Intentaré ver si el número de imágenes disponibles pasa del número de dedos de una mano (5 dedos). Seré generoso y emplearé como modelo la mano de una persona que un dedo extra (6 dedos) porque estos negacionistas son muy pejigueros.

Una pequeña búsqueda en PubMed con la frase “electron microscopy and HIV virion” arroja un total de 302 artículos. Vaya, parece que nos van a faltar dedos. Consultando estos artículo veo que no todos tienen imágenes de esos que los más reacios solicitan: viriones aislados, que haya más de dos partículas opr fotos, que tengan la escala correspondiente (es curioso esa afirmación, en las publicaciones hay que indicar siempre los aumentos y la escala) y no se cuántas cosas más. Aunque no todos tienen esas imágenes, porque igual estudian proteínas del virus, o son virus quimera, muchos de los 300 sí que las poseen en todas las combinaciones: virus fuera y dentro de la célula que infectan, aislados, en grupos, con cubiertas (mostrando las espículas –knobs y spikles-) más o menos visibles (se suelen perder en el proceso de aislamiento del virus), maduros o inmaduros y mil combinaciones más. También se han generado virus quimeras, mutantes, etc con los que se ha estudiado la infectividad y su morfología. Ya ofrecimos algunas imágenes en el “bonus track” (al final) del artículo enlazado (pinchar aquí) que incluyen las referencias bibliográficas donde se explica cómo se han obtenido. Pero como siempre hay descontentos aquí paso a mostrar unas cuantas imágenes más.

Empiezo con un clásico que ya he mostrado en otros artículos:

Esta foto muesta al virus que no el existe, el VIH. Electron microscopy of HIV-1 treated under permeabilizing conditions revealed holes in the membrane of the virus. HIV-1 samples that were untreated (A and D), treated under nonpermeabilizing conditions (B and E), or treated under permeabilizing conditions (C and F to K) were examined by transmission electron microscopy. Magnifications: ×4,000 (A and F) and ×20,000 (B to E and G to K).. Los paneles A y D muestran partículas víricas que no han sufrido ningún tratamiento. Referencia: 20

En la imagen siguiente tomada de Fitzpatrick, K. y col. (2010) PLoS Pathog. 6(3):e1000701, se observan partículas víricas silvestres y mutantes en el proceso de infección:

Electron microscopic evidence of direct virion tethering and virion-incorporation of BST-2 HeLa cells were transfected to express the complete HIV-1 genome (wild type; A, C, and E) or a genome lacking vpu (Δvpu; B, D, F, and G), then stained for cell surface BST-2 and processed for electron microscopy as described in the legend of Figure 1. Panels A-F are images of thin sections obtained using a JEOL 1200C microscope operated at 80 keV. Panel G is a projection view of a thick section (approximately 250 nm) derived from a tomographic tilt series of images obtained using an FEI Titan electron microscope operated at 300 keV

La siguiente imagen tomada de Bartonova, V. y col. (2008) J. Biol. Chem. 283:32024-33033, nos muestra el proceso de infección y la formación de distintas partículas víricas en función del grado de su madurez.

Ultrastructure of budding sites and released particles. A, representative section of a plasma membrane region of HeLaP4 cells transfected with wild-type pNL4-3 showing budding sites and immature virions. These structures appeared similar for wild-type HIV-1 and all mutant constructs. B, representative sections depicting normal mature virions released from wild-type pNL4-3 transfected cells (left panel) and aberrant HIV-1 structures released from variant L211S transfected cells (right panel). Similar phenotypes were observed for the other assembly-competent (N183A, E187A) and assembly-incompetent (Y169A, L211A) variants, respectively. C, enlarged examples of HIV-1 particles displaying regular cone-shaped (a and b) or aberrant cores (c-h). Quantification of the relative numbers of different structures observed for all variants is shown in supplemental Fig. S2. Bar size, 200 nm.

La siguiente imagen ha sido tomada de Waheed, A.A., y col. (2008) J Virol. 82:9776-9781.

AME treatment distorts the morphology and increases the density of purified virions. (A) Virions collected from HeLa cells 24 h posttransfection with pNL4-3 were treated (+) or not (–) with AME for 2 h, pelleted by ultracentrifugation, fixed, and analyzed by electron microscopy.

Imagen tomada de Abdurahman, S., y col. (2008) Antimicrob Agents Chemother. 52:3737-3744.

Effect of -HGA (at 10 µM) on virion morphology. A total of 439 virus particles obtained from untreated and 401 virus particles obtained from -HGA-treated HIV-1 SF-2-infected H9 cells were analyzed by TEM. (B) Typical examples of TEM images representing the various core morphologies depicted in panel A obtained in the absence or presence of -HGA. Scale bar, 100 nm.

Imagen siguiente tomada de Tang S. et al. (2007) Virology. 359:105-115.

Transmission electron microscopy of WT and mutant virions produced in HeLa and MT-4 cells. HeLa cells: (A) HIV-1 WT; (B) W23F. MT-4 cells: (C) WT; (D) W23F/V26I; (E) W23F/V26I/R154K. The arrows point to representative particles in the field with a WT phenotype (i.e., having conical cones). The scale bars are 100 nm (A, B, and C) or 200 nm (D and E).

En la siguiente publicación Ott, D.E. et al. (2003) J Virol. 2003 77:5547-5556, se comparan viriones silvestres con otros inmaduros o mutantes.

Electron micrographs of virions. Transmission electron micrographs of positively stained wild-type, DelNC, PRR57G, and DelNC/PRR57G virion preparations are presented at x40,000 magnification. Enlarged images of representative virions present in this field and others are displayed underneath the field micrographs.

En la publicación Ganser, B.K. y col. (1999) Science 283:80-83. Se ha estudiado en ensamblaje de las proteínas del virus para formar un virión infectivo.

CA-NC/RNA complexes spontaneously assemble into cones in vitro. (A) TEM image of a representative field of negatively stained particles formed by the CA-NC protein on a 1400-nt HIV-1 RNA template. Conical structures are denoted by arrows. Scale bars in B is 100 nm. (B) Selected thin-sectioned TEM images of an authentic HIV-1 virion grown in culture (bottom) and a synthetic CA-NC/RNA cone assembled in vitro (top). Electron microscope preparations of virions and synthetic cores were identical, and the two objects are shown at the same magnification.

El virus VIH también ha sido estudiado mediante otras técnicas microscópicas como la crioelectromicroscopía electrónica o la tomografía electrónica que han permitido conocer algunas características del virus. Muestro tres ejemplos:

El primer ejemplo corresponde a la publicación Bennett, A.E. y col. (2009) PLoS Pathog. 5(9):e1000591.

Electron tomography of a 150 nm thick section from HIV-1 BaL infected macrophages. A tomographic slice (nominal thickness 1 nm) through a region of the cell containing a collection of viruses in an internal compartment. The expanded insets show zoomed-in images of individual immature (top) and mature (bottom) virions. Scale bar 100 nm.

El siguiente corresponde a la publicación Carlson, L.A., y col. (2008) Cell Host Microbe. 4:592-599.

Gag Organizes as a Truncated Sphere in Cryo-Electron Tomograms of Immature HIV-1(A–E) Four computational slices through a cryo-electron tomogram of an immature HIV-1 particle are shown (A–D, top) along with a surface model showing the position of the slices in the 3D volume. The slices are 2 nm thick and placed 20 nm apart. The membrane is depicted in light blue, Gag in red. Scale bars are 100 nm.

Mientras que el último que presento procede de Grünewald K. y Cyrklaff, M. (2006) Curr Opin Microbiol. 9:437-442.

Electron cryo-tomographic visualisation of extracellular virions. Human immunodeficiency virus studied by Briggs et al. consists of an envelope (blue), and an envelope-spanning core (red) of fullerene architecture, harbouring the RNA viral genome. The density marked yellow is probably Gag-derived protein not incorporated into the core. Scale bar of 100 nm applies to all panels.

Y aún podemos encontrar más fotos del virus en Moore, M.D. y col. (2008) Virology. 379:152-160.

Effects of HIV-1 protease inhibition on viral maturation. (A) Electron micrographs of individual viral particles are shown grouped according to their morphology. Each viral particle was scored as either immature, containing an electron-dense ring (or partial ring) around an electron-lucent core; mature regular, lacking an electron-dense ring but containing an electron-dense core; or mature eccentric, lacking both an electron-dense ring and an electron-dense core. Note that some of the mature eccentric cores appear to contain a core structure but it is electron-lucent; the electron-dense region in these particles is sequestered to the side of the virion, as it is in all the mature eccentric particles.

O en esta otra publicación: Abdurahman et al. Retrovirology 2007 4:19

Transmission electron microscopy analysis of mutant and wild-type virions as described previously [4

Sólo he consultado un tercio de las referencias que el PubMed ofrecía. En concreto las más modernas, ya que este servidor ordena cronológicamente. Si hubiese retrocedido más en el tiempo hubiese encontrado muchas más, ya que muchos de los estudios morfológicos y de estructuras se realizaron en los años 90 del siglo pasado. Dejo unas pocas referencias más de publicaciones que comentan aspectos morfológicos del VIH:

– Espléndidas figuras de viriones: J.A. Briggs, K. Grünewald, B. Glass, F. Förster, H.G. Kräusslich and S.D. Fuller, The Mechanism of HIV-1 core assembly: insights from three-dimensional reconstructions of authentic virions, Structure 14 (2006), pp. 15–20.

– Estupendos artículos con muchas fotos y todo el ciclo vital del VIH-1:

1. Goto, T., Nakai, M. y Ikuta. K. (1998) The life-cycle of human immunodeficiency virus type 1. Micron. 1998 29:123-38

2. Nakai, M., and Goto, T. (1996) Ultrastructure and morphogenesis of human immunodeficiency virus. Electron Microsc (Tokyo) 45:247-57

3. Gordon, L.M., Jensen, F.C., Curtain, C.C., Mobley, P.W., y Aloia, R.C. (1988) Thermotropic lipid phase separation in the human immunodeficiency virus. Biochim Biophys Acta. 943:331-342. (Esta publicación es interesante ya que además de las fotos, explica con detalle el proceso de obtención de muestras –de personas sanas, de ganglios, semen de enfermo, de ganglio de pareja del enfermo- análisis por western-blot, etc).

4. Zhu, P., Liu, J., Bess, J. Jr,, Chertova, E., Lifson, J.D., Grisé, H., Ofek, G.A., Taylor, K.A. y Roux, K.H. (2006) Distribution and three-dimensional structure of AIDS virus envelope spikes. Nature441:847-852

5. Hockley, D.J., Wood, R.D., Jacobs, J.P., Garrett. A.J. (1988) Electron microscopy of human immunodeficiency virus. J. Gen. Virol. 69:2455-2469.

Y muchaaaaas más. Quien quiera buscarlas no tiene más que bucear un poco en la literatura científica. Ya sé que esto no contentará a muchos. Éstos dan unas condiciones para definir lo que es el VIH, cuando se las ofreces entonces colocan dos o tres nuevas condiciones. Algunos llegarán a pedir imágenes del virus con la camiseta del Real Madrid.

Virus VIH sintiéndose merengue por un día. Ups, lo siento olvidé la escala

Pues nada aquí las tienen. Informo que esta es la única imagen trucada, todas las demás han sido obtenidas durante muchos años de trabajo en diferentes laboratorios de distintos países del mundo por parte de científicos que no tienen que ver entre sí. A partir de ahora quien quiera decir que las imágenes son menos que los dedos de una mano tendrá que empezar a manejar manos como la que se muestra más abajo:

Faltan fotos, aún son pocas, la mitad no valen, aquí hay dedos…….

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